臭氧对兔膝骨性关节炎关节冲洗液中细胞因子含量的影响
宋玉光叶蜀新林海
医院骨科
导语
臭氧注射技术是疼痛专业需要掌握的基本技术之一。正确应用臭氧是必要的。该文献通过“探讨臭氧对兔膝骨性关节炎关节冲洗液中细胞因子含量的影响”分析治疗机制,具有一定的参考意义。现给予分享。
摘要
目的
探讨臭氧对兔膝骨性关节炎关节冲洗液中细胞因子含量的影响。
方法
选取40只膝骨性关节炎模型新西兰兔,随机将其分为模型对照组和观察组,各20只,同时选取20只健康新西兰兔设为健康对照组。健康对照组和模型对照组兔采用空气对照治疗,观察组兔采取臭氧治疗。治疗结束后比较三组新西兰兔关节冲洗液中细胞因子白介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α和一氧化氮(NO)的含量变化。
结果
模型对照组和观察组兔治疗前膝关节冲洗液中IL-1β、TNF-α和NO的含量明显高于健康对照组(P0.05);观察组兔治疗后膝关节冲洗液中IL-1β、TNF-α和NO的含量明显对于模型对照组(P0.05)。
结论
臭氧治疗能够明显降低膝骨性关节炎兔关节冲洗液中细胞因子IL-1β、TNF-α和NO的含量,值得进一步临床研究。
膝骨性关节炎是中老年较为常见的慢性关节炎,发病因素复杂,引起患者的关节退化、软骨组织破坏以及周围软组织损伤(1)。相关的研究已经表明炎性介质与该疾病的发生有着紧密的联系,多种细胞因子参与膝骨性关节炎的发生(2)。研究证实,臭氧能够改善膝骨性关节炎患者的临床症状,具有抗炎、止痛疗效,改善患者的临床症状旦盟。但是,还没有臭氧治疗膝骨性关节炎相关机制的报道。本研究探讨臭氧对兔膝骨性关节炎关节冲洗液中细胞因子白介素(IL-1β)、肿瘤坏死因子(TNF-α)和一氧化氮(NO)含量的影响,为膝骨性关节炎的临床治疗提供参考依据。
资料和方法
1.1一般资料
选取40只膝骨性关节炎模型新西兰兔8-15月龄,体重2.4-2.7kg,雌雄不限。随机将其分为模型对照组和观察组,各20只,同时选取20只健康新西兰兔设为健康对照组。三组兔月龄、体重以及性别等一般资料比较差异无统计学意义(P0.05),具有可比性。
1.2研究方法
采用石膏将新西兰兔的左膝关节固定于伸直位,范围为踝关节下3cm到腹股沟1.5cm。建立模型的新西兰兔均为单笼喂养,并强迫其活动。6w后,随机处死1只新西兰兔,病理检查膝骨性关节炎的模型是否建立成功。确认模型建立成功后,去除固定,并剃毛。健康对照组新西兰兔不采取任何处理(5)。观察组采用1ml(20μg/ml)臭氧关节腔内注射治疗(6),健康对照组和模型对照组兔注射空气作对照,三组均治疗1次/w,共治疗2w。分别于治疗前和治疗后48h采用穿刺方法收集所有动物的膝关节冲洗液约0.8ml,将采集的样本保存于-20℃低温冰箱以备检测。
1.3观察指标
分别检测所有实验动物关节冲洗液样本中IL-1β、TNF-α和NO的含量。IL-1β和TNF-α的检测采用酶联免疫吸附(ELISA)法,检测试剂盒购于上海逸峰生物科技有限公司,每个样本设5个复孔,结果取平均值。NO的检测采用荧光法,试剂盒购于艾美捷科技有限公司。
1.4统计学方法
应用SPSS17.0软件进行分析,计量资料以x±s表示,三组间比较采用方差分析,两两比较采用LSD-t检验,组内治疗前后比较采用配对t检验。P0.05为差异有统计学意义。
2结果
模型对照组和观察组兔治疗前膝关节冲洗液中IL-1β、TNF-α和NO的含量明显高于健康对照组(P0.05):观察组兔治疗后膝关节冲洗液中IL-1β、TNF-α和NO的含量明显低于模型对照组(P0.05):健康对照组和模型对照组兔治疗前后膝关节冲洗液中IL-1β、TNF-α和NO的含量变化无统计学意义(P0.05)。见表1。
3讨论
膝骨性关节炎称为增生性、肥大性或退行性骨关节炎,严重者甚至可能导致患者残疾(7)。目前,临床治疗膝骨性关节炎的主要措施以缓解患者疼痛为主,但无法阻止或者逆转膝骨性关节炎的进展。相关研究表明臭氧治疗能够明显改善膝骨性关节炎患者的临床症状,减少炎症组织充血、促进水肿消散以及降低局部温度(8)。但是对于其治疗机制尚不完全清楚。
相关研究证实,膝骨性关节炎患者关节液中的IL-1β、TNF-α和NO的含量明显升高(9,10)。在膝骨性关节炎的病情发展过程中,IL-1β可能会通过促进蛋白溶解液的合成,以进一步加速软骨基质的降解,并影响其他细胞因子在软骨和滑膜修复和代谢中的功能(11)。此外,TNF-α还可以促进滑膜成纤维样细胞的增殖,从而诱导滑膜组织纤维化,进而改变关节软骨的微环境,促进膝骨性关节炎病情的进展(12)。相关学者认为,过量的NO能够抑制蛋白聚糖的合成,促进软骨细胞的凋亡和软骨的分解,导致软骨基质的降解(13)。因此,NO也被认为是膝骨性关节炎发生中的重要影响因素。
相关研究表明,臭氧能够促进IL-1β、TNF-α和NO等细胞因子拮抗剂的释放,从而起到降低IL-1β、TNF-α和NO等细胞因子含量的功能:此外,臭氧自身也可以直接抑制IL-1β、TNF-α和NO等细胞因子的释放,促进超氧化物歧化酶以及谷胱甘肽超氧化物酶等抗氧化酶的产生,促进间质细胞和关节软骨合成,刺激软骨和纤维原细胞增殖,修复受损组织(14)。
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